产品货号：
KM0061
中文名称：
氧化应激检测用绿色荧光探针
英文名称：
产品规格：
50μL|2×50μL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是一种检测活细胞氧化应激的新型荧光探针。此细胞膜渗透性的染料在还原态时无荧光或呈微弱荧光，一旦被活性氧物质（ROS）氧化并结合到DNA后发明亮稳定的绿色荧光，最大吸收/发射波长约~485/520nm（见下图，本探针氧化后的荧光光谱图）。其荧光信号主要定位在细胞核和线粒体。此染料能够被甲醛固定且能承受表面活性剂处理，因此，特别适合与其他兼容性染料和抗体进行多重标记检测。本探针与各种检测平台兼容，比如传统荧光显微镜、高内涵筛选仪器（HCS）、流式细胞仪、荧光酶标仪或高通量筛选（HTS）。还与各种台式仪器兼容，比如FLoid，Tali，和Attune仪器。
本探针以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供，浓度为2.5mM，操作简单，勿需清洗，与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料（50μL）足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。
保存：≤-20oC避光保存，保持干燥，1年有效。
注意事项：
1．本品对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
2．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法：
一、需要自行准备的材料
1．细胞和培养基
2．生理盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.6）
3．(可选)固定剂（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）
4．(可选)破膜剂（比如，0.5%Triton X-100）
二、实验步骤
以下步骤专门为BPAE，HepG2,U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发，优化后的染色工作浓度为5μM，但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验，建议设置浓度梯度，以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。
本探针对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
1．用待测化合物或药物处理细胞，孵育一定时间。
注：待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。
2．加本探针到细胞内使其终浓度为5μM，37℃孵育30min。
3．去除培养基，用PBS清洗3次。
4．(可选)可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在本探针染色24h内进行荧光信号检测。
5．(可选)此时可用NucBlue活细胞染料（一种细胞核复染剂）或其他复染剂如Hoechst 33342（CAT#：KM0157）对细胞染色。
6．(可选)如果与其他试剂的多重标记实验要求进行细胞透化，可用0.5%Triton X-100透化处理10min。
应用示例：
本探针测定牛肺动脉内皮细胞（BPAE）的氧化应激水平。在MatTek激光共聚焦专用玻底培养皿内铺BPAE细胞。之后用含维生素K3（100μM）或不含维生素K3的培养基37℃处理1h。向某些对照和维生素K3处理孔内加入N-乙酰半胱氨酸（NAC，50μM）。之后细胞用CellROX Green Reagent（5μM）和Hoechst 33342染色，前者加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后，在Zeiss Axiovert倒置显微镜下检测（40X物镜）。
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本探针以稳定、即用型的DMSO溶液形式提供，浓度为2.5mM，操作简单，勿需清洗，与荧光显微镜的标准工作流程兼容。每管染料（50μL）足够做1个96孔板或20张爬片。适用于任何细胞类型的氧化应激检测。
保存：≤-20oC避光保存，保持干燥，1年有效。
注意事项：
1．本品对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
2．为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法：
一、需要自行准备的材料
1．细胞和培养基
2．生理盐缓冲液（PBS，pH 7.2-7.6）
3．(可选)固定剂（比如，溶于PBS的3.7%甲醛）
4．(可选)破膜剂（比如，0.5%Triton X-100）
二、实验步骤
以下步骤专门为BPAE，HepG2,U-2 OS和RAW巨噬细胞所开发，优化后的染色工作浓度为5μM，但是此实验适用于任何细胞类型。生长培养基、细胞密度、细胞类型变化和其他因素可能会影响标记效率。在初始实验，建议设置浓度梯度，以确定最佳的实验条件和适合研究细胞类型的工作浓度。
本探针对光和空气敏感，使用过程中切记不可长时间敞开瓶盖。当瓶子开口后建议丢掉未用完的材料。
1．用待测化合物或药物处理细胞，孵育一定时间。
注：待测化合物或药物处理后没有必要去除培养基。
2．加本探针到细胞内使其终浓度为5μM，37℃孵育30min。
3．去除培养基，用PBS清洗3次。
4．(可选)可用3.7%甲醛固定细胞15min。需在本探针染色24h内进行荧光信号检测。
5．(可选)此时可用NucBlue活细胞染料（一种细胞核复染剂）或其他复染剂如Hoechst 33342（CAT#：KM0157）对细胞染色。
6．(可选)如果与其他试剂的多重标记实验要求进行细胞透化，可用0.5%Triton X-100透化处理10min。
应用示例：
本探针测定牛肺动脉内皮细胞（BPAE）的氧化应激水平。在MatTek激光共聚焦专用玻底培养皿内铺BPAE细胞。之后用含维生素K3（100μM）或不含维生素K3的培养基37℃处理1h。向某些对照和维生素K3处理孔内加入N-乙酰半胱氨酸（NAC，50μM）。之后细胞用CellROX Green Reagent（5μM）和Hoechst 33342染色，前者加入完全培养基内37℃孵育30min。细胞经PBS清洗后，在Zeiss Axiovert倒置显微镜下检测（40X物镜）。
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